荧光定量PCR仪和普通PCR仪检测区别是什么?
荧光定量PCR仪和普通PCR仪是两种常用的基因扩增技术,它们在检测原理、检测方法、检测准确性和应用范围等方面存在显著差异。所以需要根据不同类型的PCR仪采用不同方法定期检测校准,才能确保实验结果的准确性和可靠性。
一、检测校准区别
普通PCR仪:通过PCR技术将特定的DNA片段在体外进行指数级扩增,扩增过程中不涉及荧光信号的监测,因此只检测设备的温度和浓度。
荧光定量PCR仪:在PCR扩增过程中,通过荧光染料或荧光探针标记特异性地检测目标DNA片段的增加,利用荧光信号的变化实时监测DNA的扩增情况,因此需检测设备的温度和浓度、以及荧光部分。
相对来说,荧光部分的检测难度较大,检测荧光部分还需要用到特定的标物,所以检测费用更高。

荧光定量PCR仪在运行过程中,容易出现控温不准、光路缺陷等问题。我们主要对温度示值误差、温度均匀度、温度最大过冲量、平均升温速率、平均降温速率、Ct值示值误差、均匀度和精密度、通道峰值高度一致性、线性灵敏系数、熔解温度漂移、熔解温度比(光学系统物理项目)、荧光强度精密度、样本测量精密度、荧光线性相关系数、样本线性相关系数等指标进行定期检测。这些检测决定着基因扩增各个步骤的有效完成,确保试验结果的准确性。
